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DAB染色液的使用方法及注意事項(xiàng)
2025-10-16
DAB染色液用于免疫組化染色，應(yīng)用在Dako自動(dòng)染色系統(tǒng)上。DAB染色液的使用方法1.DAB顯色液配制10mMTris-HCl(pH7.6)9mL+DAB(diaminobezidin3，3-二氨基聯(lián)苯胺)+0.3%(W/V)NiCl2或CoCl21mL,顯色時(shí)加入5-10mL30%H2O2混勻后立即使用2.顯色準(zhǔn)備好含有待測(cè)蛋白的固相膜：包括電泳、轉(zhuǎn)印、封阻、一抗（或生物素）處理、辣根過(guò)氧化酶（HRP）標(biāo)記的二抗（或鏈霉親和素）處理、清洗等步驟。3.加入適量的DAB顯色液，...
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病理染色——各種組織切片方法如何選擇
2025-10-16
組織學(xué)被定義為對(duì)細(xì)胞和組織的微觀(guān)結(jié)構(gòu)（顯微解剖學(xué)）的科學(xué)研究，其重要組成就是組織的制片和染色觀(guān)察。隨著顯微鏡技術(shù)和免疫實(shí)驗(yàn)等的發(fā)展，組織制片切片技術(shù)也得到了廣泛的應(yīng)用，自常用的石蠟切片、冰凍切片中演化出了碳蠟切片、塑封切片、振動(dòng)切片和超薄切片等等適用于不同實(shí)驗(yàn)需求的制片方式。今天，小編就來(lái)帶大家一起了解一下這些切片方式和它們的應(yīng)用方向。石蠟切片碳蠟切片塑封切片超薄切片石蠟PEGHMMA、GMA環(huán)氧樹(shù)脂3-8um3-8um0.5-2um50-80nm組織結(jié)構(gòu)保存良好，能切連續(xù)薄...
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干貨分享—病理切片技術(shù)選擇與應(yīng)用指南
2025-10-16
病理切片技術(shù)全攻略：如何精準(zhǔn)選擇石蠟、冰凍、速凍、塑封切片？在科研領(lǐng)域，組織切片技術(shù)是揭示生命微觀(guān)奧秘的核心工具。無(wú)論是基因表達(dá)定位、蛋白質(zhì)互作研究，還是超微結(jié)構(gòu)解析，切片質(zhì)量直接影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性。然而，面對(duì)石蠟切片、冰凍切片、速凍切片、塑封切片等多種技術(shù)，科研工作者常陷入選擇困境。本文從科研需求出發(fā)，解析四大切片技術(shù)的原理、適用場(chǎng)景及操作要點(diǎn)，助你輕松匹配實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)！一、技術(shù)原理與科研場(chǎng)景解析?石蠟切片：形態(tài)學(xué)研究的基石技術(shù)原理：組織經(jīng)甲醛固定后，梯度脫水、透明化，石蠟包...
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關(guān)于菌株
2025-10-13
1、問(wèn)：斜面低溫保藏法答：將待保藏的菌種接種在合適的斜面培養(yǎng)基上,在相應(yīng)的條件下培養(yǎng)至得到充足的菌體或者孢子,隨后密封試管置于4攝氏度左右保存,具體保存溫度按照保存菌種設(shè)定.保藏時(shí)間依微生物的種類(lèi)從1個(gè)月到4個(gè)月不等.此法適用范圍廣(細(xì)菌、霉菌、放線(xiàn)菌、酵母均適用),操作簡(jiǎn)便,成本低廉,復(fù)蘇方便,人員能隨時(shí)對(duì)微生物的狀態(tài)進(jìn)行觀(guān)察.缺點(diǎn)是保藏時(shí)間較短,需要經(jīng)常傳代處理,因連續(xù)傳代而容易引入基因突變或者雜菌,培養(yǎng)基的理化性質(zhì)及微生物代謝產(chǎn)物等原因還會(huì)導(dǎo)致微生物性狀發(fā)生改變.因此斜...
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關(guān)于PCR，你知道多少？（四） ----幾種特殊的PCR
2025-10-13
1、錨定PCR（anchoredPCR）通常采用的PCR反應(yīng)必須知道欲擴(kuò)增的DNA或RNA片段兩側(cè)的序列，而在大多數(shù)情況下對(duì)某些序列本身或其旁側(cè)序列并不清楚，“錨定PCR”可以幫助克服序列未知或序列未知帶來(lái)的障礙。基本做法是：分離細(xì)胞總RNA或者mRNA，在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成cDNA，通過(guò)DNA末端轉(zhuǎn)移酶在cDNA3’末端加上poly（dG）尾巴。與此poly（dG）相對(duì)應(yīng)的錨定引物poly（dC）為保證擴(kuò)增特異性，建議此段旁聚（dC）在十二聚以上，5’端可帶上某些限制酶序...
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關(guān)于PCR，你知道多少？（三）----Taq DNA聚合酶
2025-10-13
----TaqDNA聚合酶在PCR反應(yīng)中，毫無(wú)疑問(wèn)的DNA聚合酶是最關(guān)鍵的因素。PCR最初使用的DNA聚合酶是大腸桿菌DNA聚合酶I的Klenow片段。但該酶存在很多缺陷，使之不能廣為應(yīng)用，比如：熱穩(wěn)定性差，每次DNA熱變性后大部分酶都被滅活，需要重新加入，每個(gè)循環(huán)都要重新加入；Klenow酶反應(yīng)溫度較低，引物和模板容易形成非特異性配對(duì)，產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增。后來(lái)人們?cè)褂眠^(guò)T4DNA聚合酶和T7DNA聚合酶，兩者雖使擴(kuò)增特異性增加，且使DNA合成速度提高了，但是由于其對(duì)熱的穩(wěn)定...
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關(guān)于PCR，你知道多少？（二）
2025-10-13
----PCR反應(yīng)引物設(shè)計(jì)PCR反應(yīng)中引物起著很重要的作用。模板的不同、欲擴(kuò)增的片段不同、需要的片段長(zhǎng)度不同或者是用途不同等等，對(duì)引物的要求是不一樣的。PCR作為一種體外酶促反應(yīng)，其效率和特異性主要取決于兩個(gè)方面，一是引物和模板結(jié)合的特異性，二是多聚酶對(duì)引物的有效延伸。引物設(shè)計(jì)的總原則就是提高擴(kuò)增的效率和特異性。引物設(shè)計(jì)的原則一般遵循下列幾項(xiàng)：1、引物的長(zhǎng)度以15～30bp為宜。引物過(guò)短會(huì)使特異性降低，過(guò)長(zhǎng)則成本增加，而且也會(huì)降低特異性。常用的是18-27bp，但不應(yīng)大于38...
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關(guān)于PCR，你知道多少？（一）
2025-10-13
PCR的原理多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerasechainreaction）簡(jiǎn)稱(chēng)PCR技術(shù)，是近30多年發(fā)展起來(lái)的一種體外擴(kuò)增特異性DNA片段的技術(shù)，可在數(shù)小時(shí)之內(nèi)對(duì)僅有幾個(gè)拷貝的基因放大千萬(wàn)倍。那么，PCR的原理是怎樣的呢？PCR技術(shù)實(shí)際上是在模板DNA、引物以及原料（四種脫氧核糖核苷酸）在適宜的反應(yīng)條件下，通過(guò)DNA聚合酶的酶促反應(yīng)完成DNA擴(kuò)增的過(guò)程。PCR技術(shù)的特異性取決于引物和模板DNA結(jié)合的特異性。PCR反應(yīng)分為三步：1）變性：通過(guò)加熱時(shí)DNA雙螺旋的氫鍵斷裂，雙...
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